在临床医疗中，常会遇到因恶性肿瘤放疗和化疗、血液病、以及骨髓移植等原因引起白细胞、红细胞、血小板减少的情况。对于肾性贫血、慢性贫血及白细胞减少和粒细胞缺乏，可用重组细胞因子如红细胞生成素、粒巨噬细胞集落刺激因子和粒细胞集落刺激因子进行治疗，特异性地使红细胞和白细胞恢复正常。而对于与止血、凝血机能密切相关的血小板减少，却一直没有找到有效的解决方法，到目前为止临床主要依赖输注浓缩血小板进行治疗。

血小板的困惑

　　近年来，随着临床对血小板的需求不断增加，血小板的制备和储存状况也逐步改善，但是血小板贮存损伤(PSL)的存在严重影响了血小板的输后体内恢复率及寿命，削弱了临床治疗效果，甚至引起输注无效。由于血小板的寿命很短（约8~10天），在贮存期间，因活化或新陈代谢衰竭导致血小板膜屏障功能受损，从而引起血小板肿胀甚至溶解，而且输注血小板可能引起输血反应或感染血源性疾病，甚至产生血小板抗体，并抑制内源性血小板生成素（TPO）的产生，延缓血小板的恢复，同时这一方法价格昂贵，一般输一袋血小板（约10个单位）的费用在1500~2000元左右，给患者和医生带来很大的困惑。所以人们一直在寻找一种更好的治疗血小板减少的方法。

　　前几年，治疗血小板减少的药物只有重组白细胞介素11（rhIL-11）。rhIL-11对血小板生长的刺激作用仅为中等，同时在临床应用上存在用量大、不良反应较多的问题，因此人们还在不断开发疗效更好、毒性更低的药物。

TPO开启希望之门

　　由北京大学血研所承担的国家“九五”科技攻关课题“血小板减少症的生物治疗新方法研究”得出结论，TPO基因治疗血小板减少症可行。他们将以昆虫杆状病毒为载体，由四环素系统调控的TPO基因用电脉冲刺激介导的裸质粒肌肉注射法注入小鼠体内，实现了TPO基因在小鼠体内高效、稳定的表达，使其外周血小板计数升高至正常小鼠的2～3倍。

　　以往的研究表明，TPO水平与血液中血小板的数量呈反比，血小板减少时TPO水平明显升高，而血小板生成增多时，TPO又降至低水平，说明TPO是体内调节血小板数量的特异因子。在动物和人体骨髓细胞体外培养中rhTPO可刺激巨核细胞集落的产生，甚至可使CD34+细胞向巨核细胞系转化；rhTPO通过与CD34+细胞、巨核细胞和血小板表面的c-Mpl受体结合，酪氨酸激酶活化，激活信号传递系统，包括Janus激酶、she激酶和Grb激酶，使CD34+细胞向巨核细胞系转化，在巨核细胞发育成熟的晚期，促进其体积增大和产生血小板增多。除此之外，TPO也与促红细胞生成素（EPO）、干细胞因子（SCF）、白细胞介素3（IL-3）、白细胞介素11（IL-11）等有协同作用，促进红系、粒系的增生，并促进细胞进入增殖周期。

　　科学家们还发现，在找到TPO之前已知的对巨核系有刺激作用的细胞因子中，IL-11，IL-6，IL-3和SCF都只作用于巨核系发育的个别阶段。SCF，IL-3作用于干细胞向巨核系分化；IL-6，IL-11作用于巨核细胞前体。只有TPO作用于自干细胞分化至形成成熟血小板的各个阶段。在巨核系发育末期，巨核细胞多倍体化并分裂成有功能的血小板的过程中，TPO的作用尤其显著。实验显示，IL-6和IL-11只有在相当高的剂量（50ng/ml），并有IL-3或SCF的存在下才能刺激血小板显著增多，而TPO只在极低的剂量（0.75ng/ml），不需其它细胞因子的参与即可刺激出大量血小板。与IL-11相比，TPO刺激生成的巨核细胞多倍体数更高。结合其它同类试验的结果，科学家得结论：TPO是巨核系最基本的调控因子。

rhTPO研制中国领先

　　目前，国外医药公司对rhTPO的研制尚处于Ⅲ期临床试验阶段。而沈阳三生制药股份有限公司研制的rhTPO已经完成Ⅱ/Ⅲ期临床试验，获得新药证书和生产批件，并获得两项国家发明专利授权，将在全球率先实现规模化生产。

　　据了解，沈阳三生制药研制的是通过哺乳动物细胞表达的rhTPO，具有332个氨基酸，为正确、完整修饰的全长分子，与天然TPO极为相似。临床试验表明rhTPO可以缩短血小板减少症的持续时间或严重性，减少输注血小板的次数或在健康血小板捐献者进行血小板动员。另一种在结构和功能上与TPO接近的是由Amgen和Krin合作开发的聚乙二醇重组巨核细胞生长与发育因子（PEG-MGDF），是半长、截短的分子，只含有TPO分子氨基端的165个氨基酸，用聚乙二醇包埋以延长半衰期，与天然TPO存在较大的差异，在临床试验中发现中和性抗体，已经于1998年停止临床试验，此后该公司转向小分子多肽的研究。

　　沈阳三生制药研制的rhTPO（“特比奥”）应用最新的分子生物学技术，独立克隆和筛选了人特异TPO基因，并获得高表达细胞株，表达产物与天然TPO在氨基酸序列上完全一致，糖基化水平高，能够特异性刺激巨核细胞的分化和增殖，提高体内血小板的水平，同时没有中和性抗体产生。因此，全长分子的rhTPO具有广阔的临床应用前景，将在预防和治疗肿瘤化疗和放疗引起的血小板减少等方面起到积极作用。

试验数据有效支持

　　通过中试和临床前动物试验的数据证明，沈阳三生制药研制的rhTPO糖基化水平高，能够特异性刺激巨核细胞的分化和增殖，在临床药效学、药理学、毒理学、药代动力学等方面都表现出较好的结果。而Ⅱ/Ⅲ期临床试验结果充分证明了沈阳三生制药研制的rhTPO的安全性和有效性。在化疗后应用rhTPO血小板计数升到75×109/L的例数（有效例数）达到94.4%，与对照周期同比差异非常显著（P=0.005）。对化疗后血小板最低值低于50×109/L的肿瘤患者，应用rhTPO后血小板计数升到75×109/L的例数（有效例数）达到91.6%，与对照周期同比差异非常显著（P=0.008），提示rhTPO对化疗后血小板减少症有显著疗效。相比白细胞介素-11，rhTPO的安全性和疗效都十分明显。

　　结果表明，rhTPO能够减轻化疗后血小板明显减少的实体瘤患者和急性白血病缓解后患者血小板下降的程度，加速血小板计数的恢复，减少输注血小板的次数和数量。本品应在临床医师指导下使用。具体用法、剂量和疗程因病而异，推荐剂量和方法如下：

　　恶性实体肿瘤化疗时，预计药物剂量可能引起血小板减少及诱发出血且需要升高血小板时，可于给药结束后6~24小时皮下注射本品，剂量为每日每公斤体重300 U，每日一次，连续应用14天；用药过程中待血小板计数恢复至100?109/L以上，或血小板计数绝对值升高≥50?109/L时即应停用。当化疗中伴发白细胞严重减少或出现贫血时，本品可分别与重组人粒细胞集落刺激因子（rhG-CSF）或重组人红细胞生成素（rhEPO）合并使用。

应用前景广阔

　　据有关专家介绍，rhTPO上市后的临床应用主要有以下几个方面：实体瘤化疗后、骨髓移植、急性白血病化疗后血小板减少、再障和其他骨髓功能不全、特发性血小板减少性紫癜（ITP）及HIV的血小板减少等。
　　（1）肿瘤化疗诱发的血小板减少症，Ⅰ/Ⅱ期临床试验表明，rhTPO对化疗前正常骨髓功能和化疗后的骨髓抑制状态均能升高外周血血小板的数量，其升高幅度呈剂量依赖性，并可减少病人对血小板输注的需求。

　　（2）大剂量化疗时用于外周血祖细胞的动员，使CD34＋细胞达到一定的数量，并加快造血功能的恢复。rhTPO与G－CSF联合应用可使更多的巨核细胞祖细胞增加。

　　（3）血小板减少性紫癜（ITP）患者应用rhTPO后，血小板计数明显升高，rhTPO治疗ITP的总有效率为85%。

　　（4）在血小板成份输血中的应用，临床试验表明，rhTPO一次注射可使造血功能正常的病人的血小板增加3倍，且血小板寿命和功能正常。采集的血小板在5天之内，根据病人的需求输给病人，同时rhTPO也可用于正常血小板捐献者，进行血小板采集的动员。

　　（5）因大剂量化疗，骨髓或外周血干细胞移植后，仍有10～20％病人血小板不能恢复，需要依赖输注血小板。rhTPO可使病人减轻对血小板输注的依赖。

　　此外，rhTPO在骨髓离体培养，以及与其它细胞因子的不同组合，对脐带血或外周血造血干细胞进行体外扩增、定向诱导分化等领域也将具有广阔的应用前景。

临床意义独特

　　现代输血领域中血小板疗法的最新概念是“越纯越好”，这有利于减少不应性和发热反应。进行自体造血祖细胞体外定向扩增和利用基因工程技术克隆重组人类促血小板生成素，刺激巨核细胞生成和血小板产生，用于严重血小板减少症，使临床浓缩血小板需求的增加减缓。专家认为，重组人血小板生成素，填补了对骨髓三大血细胞系（红细胞系、粒细胞系和巨核细胞系）中缺乏调节巨核细胞特异性药物的空白。三生公司的重组人血小板生成素 “特比奥”作为世界上第一个上市的、拥有自主知识产权的rhTPO, 不仅将解决长期困惑临床的一大难题——血小板减少症，为患者提供了一种新的有效治疗手段，而且在疗效、安全性及价格方面均优于现有其他方法，无疑将成为2005年血小板减少症新战略。